稱取5 g淡豆豉樣品置于滅菌小錐形瓶中,加入45 m L滅菌生理鹽水振蕩,離心,吸取上清;8 000r/min離心10 min,收集沉淀;加入無菌磷酸鹽緩沖液(PBS),離心,棄上清,反復3遍,得菌體沉淀。加入細胞裂解液充分懸浮,置液氮中凝固后,迅速放入65℃水浴融化,反復凍融5次;將離心管置于37℃水浴10 min;加10%SDS溶液30μL和50mg/m L溶菌酶30μL,37℃水浴30 min,加等體積的苯酚-氯仿-異戊醇(25∶24∶1),冰上放置8 min,12 000 r/min,離心3 min,重復抽提2次;上清液中加入0.1倍體積乙酸鈉和0.8倍體積異丙醇,輕輕混勻,-20℃沉淀30 min,12 000 r/min離心5 min,收集核酸沉淀,用冷70%乙醇洗滌沉淀,DNA沉淀干燥后溶于TE緩沖液(10 mmol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA,p H 8.0)100μL中,加入終質量濃度為0.5μg/m L RNase A溶液并在37℃下水浴消化2 h,以去除RNA,置-20℃冰箱保存備用